Objective Quantification of the Ki67 Proliferative Index in Neuroendocrine Tumors of the Gastroenteropancreatic System: A Comparison of Digital Image Analysis With Manual Methods

시절이 몹시 수상한 관계로 논문부터 밝히고.. ;-)

2012년 9월 28일 AJSP(The American Journal of Surgical Pathology) 의 PAP(Published Ahead-of-Print)로 올라온 논문이다. (PMID: 23026928, DOI: 10.1097/PAS.0b013e318263207c)

Gastroenteropancreatic system (GEP) 에서 발생하는 Neuroendocrine tumor(NET) 의 진단 기준에 보면 mitotic activity 와 더불어서 Ki-67 proliferation index 를 참고하도록 되어 있는데, 이 Ki-67 을 평가하는데 총 3가지 방법을 사용하여 비교한 논문이다.

첫 번째 방법은 Aperio 사의 슬라이드 스캐너와 분석 프로그램을 이용한 방법으로 x20 로 스캔한 다음에 Ki-67 이 많이 염색된 부분으로 수작업으로 설정하여 -> stromal cell 과 lymphocyte 는 수작업으로 제외시키고 -> 종양세포에서 양성과 음성인 세포를 설정하게끔 하였다. (Digital Image Analysis, DIA)

두 번째 방법은 첫 번째 방법에서 사용한 이미지를 프린트 한 다음 일일이 수작업으로 세었다. 평균적으로 2600개 정도의 종양 세포를 측정하였다. (Manual Count, MC)

세 번째 방법은 첫 번째 방법에서 사용한 이미지를 파워포인트를 사용한 프리젠테이션으로 18명의 병리학자들이 맨눈으로 평가하도록 했다고 한다. ("Eyeballed" Estimate, EE)

암만해도 MC 방법이 가장 합당할 것 같지만.. DIA 방법을 기준으로 삼아서 통계를 진행했다고 하고 있다.

DIA 와 MC 방법은 당연하게도 엄청 일치하는 결과를 보여주고 있다. EE 방법은 개인간에는 상당히 불일치하지만, 18명의 평균과 DIA 방법을 비교했을 때에는 꽤 일치하는 결과를 보여주고 있다.

EE와 DIA 방법을 Ki-67 index 에 따라서 비교하여 보았을 때, 0-1% 의 정도 값을 가질 때에는 EE 방법이 꽤 정확하며, 1-5% 까지는 부정확하다가, 5-15% 정도까지는 비교적 일치하는 결과를 그리고 놀랍게도 20%가 넘어가면 꽤 불

일치하게 나온다.

여유가 있다면 사실 2,000개의 종양 세포를 세는거 어렵지 않은데... 여유가 있다면 말이야.. ㅎㅎ

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이외로 논문을 읽어보면서 궁금해서 추가로 찾아본 것들은..

MC 방법으로 평가할 때에 500-2000개의 종양세포를 세어야 한다고 되어 있는데, 500개라고 지정한 논문은 못 찾았지만, 2000개라고 언급한 논문은 찾았다. Free Full-Text 인 논문이고, 영어를 잘 못하는 관계로 원문을 긁어 붙인다.

ENETS(European NeuroEndocrine Tumor Society) 라는 참 부지런한 모임에서 제시하였다. OTL

Rindi G, Kloppel G, Alhman H, Caplin M, Couvelard A, de Herder WW, et al. TNM staging of foregut (neuro)endocrine tumors: a consensus proposal including a grading system. Virchows Arch. 2006 Oct;449(4):395-401. PubMed PMID: 16967267. Pubmed Central PMCID: 1888719.

Mitotic count and Ki-67 index

We propose that mitoses should be counted on hematoxylin and eosin-stained slides in at least 40 HPFs, where possible. The mitoses should be assessed in areas where they are most frequent after a general slide survey. For Ki-67 assessment, the MIB1 antibody is recommended at the conditions that have been established at the laboratory in question. The Ki-67 index should be assessed in 2,000 tumor cells in areas where the highest nuclear labeling is observed (often but not exclusively at the tumor periphery).